尿細管・糸球体フィードバック機構と高血圧，糖尿病病態モデル微小血管画像イメージング

はじめに（続き）

　腎血管画像アプローチにあたり，その臨床の目的は大きく２つ存在する．１つは腫瘍血管画像イメージング特性から悪性と良性の鑑別を行うこと，もう１つは腎血管画像イメージングから腎機能を評価することである．以前は，造影超音波検査か腎微小血管画像イメージングから腎細胞癌の診断１）と移植腎機能２）について述べた．また前回は，ネフロンの一部である急性虚血性腎不全の責任血管である尿細管を栄養する周囲微小血管イメージングから血流の定量化を行い，病態による違いについて述べた．腎臓最小単位であるネフロンはvasculo-tubular unitを構成する独特な構造を有し，その糸球体微小血管の径変化は直接濾過に機能に影響を及ぼし，生体内で最も機能を反映する微小血管である．今回は，近年時間，空間分解能の目覚しい進歩を遂げている腎血管画像検査のアプローチにあたり，その糸球体画像イメージング（細動脈血管径変化）から生理的メカニズムと末期腎不全の原因として重要な高血圧，糖尿病の器質的異常のない初期の病態モデルを微小血管径変化とイメージング比較し，その特徴を述べる．

方法

　そこで我々は，前回応用したペンシル型CCD生体顕微鏡を用いて麻酔下イヌ３）またはラット４）を対象に実験を行った．１画面を33m/秒で撮像することが可能なCCD素子を内蔵するシステムで，ニードルの周囲に光源用ライトガイドを有する．ペンシル型プローブの先端には１つの円錐型のレンズを使用し，分解能を高めている．円錐レンズの先端は１mmで，小動物の腎臓にもアクセス可能である．照明光は光源（160Wメタルハライドランプ，シグマプレシジョン）からガイド用光ファイバーを通して観測視野周囲の組織へ照射され，組織内で散乱した光によって観測部位を照射する．円錐レンズを通して結ばれた観測画像は，約12万画素の単板CCDによってビデオ信号に変換され，VTRに記録される．その画像は，ビデオＡ／Ｄ変換装置（DFM，計測技術研究所）でデジタル化して，解析システム（Power Mac G4）により画像データファイルとして蓄積する．解析システムでは，画像データの濃度調節およびノイズ除去などの画像処理を行い，糸球体サイズ，輸入，輸出細動脈血管径をそのdensity profileから算出５）する（図１）６）．

ペンシルレンス先端（径：1 mm）は腎被膜を経由し，対象微小血管上に接触させた．プローブ先端は，対象となる血管を圧迫した後，これを徐々に解除し，血流が流れ始めてから，さらにX, YそしてZ軸を微細に調節可能なマイクロマニュピレーターを用いて数10μm手前に引き，血管イメージが安定し，かつ明瞭に得られる部位に固定した．次いで，focus ringを回してピントを合わせ血管像を観察したが，血管イメージのコントラストを付けるために，赤血球の補色となるグリーンフィルターを光源とプローブ間に装着した．この糸球体微小循環と全身血行動態パラメーター（血圧，心拍数，腎血流量）を同時に測定した（図１）．